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根据分子筛层析蛋白纯化系统带电性质进行分离
发布时间:2019-10-29   点击次数:8次
分子筛层析蛋白纯化系统一般是通过生化方法吧蛋白提取出来,蛋白质带有电荷么,是将混合样品中的蛋白质,其原理是向基于蛋白质PI不同用等电聚焦,电泳时的正极与负极都会发生电解反应,向着与其电性相反的电极移动的现象称为电泳。是根据蛋白质的电荷不同即酸碱性质不同分离蛋白质混合物的方法。
 
分子筛层析蛋白纯化系统小分子量的化合物进入凝胶孔中,滞留时间长;大分子量的化合物不能进入空中,会更早的被洗脱下来。分子筛色谱的优势在于能够处理至少1nmol的目的蛋白,并得到很好的分离效果,分离时间也很短,一般在3个小时以内,同时获得的层析分离峰也更小。
 
根据分子筛层析蛋白纯化系统带电性质进行分离
蛋白质在不同pH环境中带电性质和电荷数量不同,可将其分开。
1、电泳法
  各种蛋白质在同一pH条件下,因分子量和电荷数量不同而在电场中的迁移率不同而得以分开。值得重视的是等电聚焦电泳,这是利用一种两性电解质作为载体,电泳时两性电解质形成一个由正极到负极逐渐增加的pH梯度,当带一定电荷的蛋白质在其中泳动时,到达各自等电点的pH位置就停止,此法可用于分析和制备各种蛋白质。
 
2、离子交换层析法
  离子交换剂有阳离子交换剂和阴离子交换剂,当被分离的蛋白质溶液流经离子交换层析柱时,带有与离子交换剂相反电荷的蛋白质被吸附在离子交换剂上,随后用改变pH或离子强度办法将吸附的蛋白质洗脱下来。

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